碧云天生产的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit)，是一种以萤光素(luciferin)为底物高信号稳定性检测萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)活性的试剂盒。

本产品是萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (RG007)的不同包装版本，两者的检测效果完全一致。本产品，即RG005/RG006为即用型液体，其优点是无需配制即可直接使用，但需要-80℃保存，如果在-20℃保存时间较长后检测效果会逐渐下降。萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II，即RG007，为RG005/RG006的冻干粉版本，优点是在-20℃保存非常稳定，缺点是使用前需要使用提供的缓冲液充分溶解底物冻干粉后才能使用。

本产品的性能基本达到甚至在某些方面优于国外主要同类产品。本产品的用途与碧云天的同类产品萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) (Enhanced Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit)及Promega公司的Luciferase Assay System基本相同。本产品(RG005/RG006)的化学发光信号稳定性显著优于萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) (RG009)及国外同类产品(Competitor P) (图1B)，发光强度也可以达到萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) (RG009)及国外同类产品(Competitor P)的40% (图1A)。本产品与RG009及国外同类产品(Competitor P)的检测效果比较参见图1。

图1. 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)的检测效果对比图。图中所示为本产品和碧云天的同类产品萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) (RG009)及国外同类产品(Competitor P)对转染阳性萤火虫萤光素酶报告基因质粒的HeLa细胞裂解样品的检测效果。图A为化学发光强度的检测效果对比图，图B为化学发光稳定性的检测效果对比图。实际读数会因细胞种类、转染效率、报告基因质粒、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

本产品发光信号稳定。本产品的发光信号稳定性相对比较好，1分钟内信号基本保持稳定，信号变动不超过2%，3分钟内的信号变动不超过5%，5分钟内信号波动不超过10%，信号半衰期约40分钟，在发光稳定性方面显著优于RG009和国外同类产品Competitor P (图1B)，特别适用于待测样品数量较多的96孔板中进行萤火虫萤光素酶活性的多孔测定。

本产品发光强度高。对于相同的细胞样品，本产品的发光效果可以达到RG009和国外同类产品的约40%，虽然低于RG009和国外同类产品(Competitor P)，但是发光强度相对已经非常高，可以满足各种常规检测。如果样品中萤火虫萤光素酶的表达水平非常低时，推荐使用发光强度和灵敏度更高的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) (RG009/RG010)。

本产品操作简单，读数稳定，检测速度快，从样品制备到完成检测仅需约20分钟。本试剂盒中提供的萤火虫萤光素酶检测试剂为即用型试剂，只需将100微升萤火虫萤光素酶检测试剂与20-100微升裂解制备的细胞样品混合后即可立即进行化学发光检测。并且发光信号比较稳定，通常5分钟内信号下降不超过10%。

本产品稳定性好。本试剂盒中的萤火虫萤光素酶检测试剂的稳定性非常好，反复冻融5次对检测效果无明显影响，反复冻融10次检测效果下降不超过10%。在4℃条件下，保存3天检测效果下降不超过20%，保存5天检测效果下降不超过30%，保存7天仍可保留60%以上的检测效果。在室温保存1天可保留70%以上的检测效果，室温保存3天可保留60%以上的检测效果，37℃保存1天可保留50%以上的检测效果。萤火虫萤光素酶检测试剂即使仅保留约50%的检测效果，仍可以满足各种常规检测的要求。

萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以催化luciferin氧化成oxyluciferin。在luciferin氧化的过程中，会发出生物萤光(bioluminescence)。生物萤光可以通过化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪进行测定[1]。本试剂盒的检测原理参考图2。

图2. 萤火虫萤光素酶的检测原理图。

通过萤光素和萤光素酶这一生物发光体系，可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣基因的转录调控元件或5'启动子区克隆在luciferase的上游，或把3'-UTR区克隆在luciferase的下游等，构建成报告基因(reporter gene)质粒。然后转染细胞，用适当药物等处理细胞后裂解细胞，测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用[2]。

关于碧云天萤光素酶报告基因检测试剂盒相关产品的比较和选择，请参考碧云天的相关网页：
http://www.beyotime.com/support/luciferase-reporter-gene-assay.htm

萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。

萤火虫萤光素酶催化luciferin发光的最强发光波长为560nm (centered around 560nm)。

本试剂盒RG005和RG006分别可以测定100个和1000个样品。